論文開題報告：蛋白核小球藻對氧氟沙星脅迫的響應

大學本科畢業(yè)論文(設計)開題報告
學院：化工學院　　　　　　　　　　　　　專業(yè)班級：09環(huán)境工程

課題名稱 蛋白核小球藻對氧氟沙星脅迫的響應

1、本課題的的研究目的和意義：
蛋白核小球藻是一種低等植物，屬于綠藻門、色球藻目、小球藻屬，是本屬植物中唯一具有蛋白核的種類。在小球藻的細胞內(nèi)含有豐富的葉綠素，有吸附并排除毒素的作用，可以排出體內(nèi)的有害物質(zhì)。實驗證明小球藻有免疫調(diào)節(jié)作用，對大腸桿菌和病毒感染能起到抑制作用。氧氟沙星( oflo*acin，OFL*) 具有抗菌譜廣、抗菌活性強的特點，且與其它抗菌藥物無交叉耐藥性。本實驗研究了不同濃度的氧氟沙星對小球藻的生長狀況、酶活性的影響，以期探討氧氟沙星對蛋白核小球藻可能的毒性作用機制。
2、文獻綜述：
藻類植物一般位于食物鏈的最底端，作為水生生態(tài)系統(tǒng)的初級生產(chǎn)者，其種類的多樣性和初級生產(chǎn)量會直接影響水生態(tài)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)功能，在水生生態(tài)系統(tǒng)中具有重要意義，因而成為監(jiān)測和評價水環(huán)境質(zhì)量的
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時間延長，斜生柵藻對OFL* 逐漸產(chǎn)生一定的耐受能力，使藻細胞恢復逐漸加快。吳銀寶等[8]研究了另一種喹諾酮類抗生素———恩諾沙星對雨生紅球藻的毒性，這兩種抗生素的藻類毒性均隨時間延長而減小，且氧氟沙星對藻類的毒性可能強于恩諾沙星，但毒性差異也可能是由藻種的差異所致。
目前許多學者認為藻類中富含豐富的酯類和甘油，是制備生物柴油的良好原料，并對一些藻進行了研究。Jin等人對小球藻進行了研究，得出結(jié)論小球藻可作為生物柴油的原料[9-10]。小球藻可耐高濃度的CO2和高溫，可用于固定排放出來的CO2。小球藻屬和柵藻屬還可以去除培養(yǎng)基中多余的營養(yǎng)物氮和磷，可用于治理污水[11-12],它們的提取物也可作為食品添加劑加入到甜點、面條等食物中[13]。由此可見，小球藻有重要的利用價值，因此本文選取了這種藻作為實驗藻。
本實驗選取目前被廣泛使用的抗生素——氧氟沙星，研究暴露于抗生素的蛋白核小球藻代謝的影響，以期為準確評估氧氟沙星對藻類的毒性以及篩選有效的生物標志物提供理論依據(jù)。

3、本課題的主要研究內(nèi)容（提綱）和成果形式：
3.1 研究內(nèi)容
通過向小球藻中添加不同濃度的OFL*，確定OFL*的半有效濃度，測定小球藻的生長狀況以及某些酶的活性，試圖探討OFL*對蛋白核小球藻作用的機理。
3.1.1 關(guān)系曲線的繪制
根據(jù)血球計數(shù)板計數(shù)以及分光光度計測吸光度，得到水華微囊藻和吸光度之間的關(guān)系曲線。
3.1.2 確定OFL*的半有效濃度
通過分析不同濃度OFL*作用下的藻細胞密度-吸光度標準曲線計算藻細胞密度，進而計算生長抑制率，用概率單位-濃度對數(shù)法求出半數(shù)效應濃度。
3.1.3 不同濃度的OFL* 對蛋白核小球藻生物量的影響
通過分析不同濃度OFL*作用下小球藻光密度值，探討OFL*對小球藻生長的影響。
3.1.4 不同濃度的OFL*對蛋白核小球藻抗氧化系統(tǒng)的影響
通過分析不同濃度OFL*作用下小球藻的超氧化物歧化酶SOD、過氧化氫酶CAT和丙二醛的變化，來探討OFL*對小球藻抗氧化系統(tǒng)的影響。




3.2 成果形式
本課題研究的成果以數(shù)據(jù)、圖表以及機理分析的形式進行表達，數(shù)據(jù)包括原始數(shù)據(jù)和計算分析獲得的數(shù)據(jù)，然后用圖表將關(guān)聯(lián)的數(shù)據(jù)形象地表示出來，以便于對整個研究過程進行機理分析與討論。






4、擬解決的關(guān)鍵問題：

本項實驗的關(guān)鍵問題是探索出具有抑制作用的OFL*的半數(shù)效應濃度濃度，從而進一步分析抑制作用的機制。


5、研究思路、方法和步驟：
（1）研究思路



（2）方法和步驟
A. 關(guān)系曲線的繪制
用血球計數(shù)板顯微計數(shù)法測定藻細胞密度，并于680nm波長處測定其吸光度，從而得到蛋白核小球藻藻密度與OD680的關(guān)系曲線。
B. 確定OFL*的半有效濃度
將不同濃度的OFL*分別加入到小球藻中，其中包括一個空白對照組和幾個濃度組，每組設定三個平行，每天于24 h、48 h、72 h、96 h 取樣測定吸光度。通過藻細胞密度-吸光度標準曲線計算藻細胞密度，進而計算生長抑制率，用概率單位-濃度對數(shù)法求出半數(shù)效應濃度。
C．不同濃度的OFL* 對小球藻生物量的影響
將不同濃度的OFL*分別加入到小球藻中，其中包括一個空白對照組和幾個濃度組，每組設定三個平行，每天取樣測定吸光度。細胞數(shù)的測定：同時取1 ml藻液用魯格氏液固定，取0.1 ml在顯微鏡下用血球計數(shù)板計數(shù)。
D. 不同濃度的O ……（未完，全文共5525字，當前僅顯示1940字，請閱讀下面提示信息。收藏《論文開題報告：蛋白核小球藻對氧氟沙星脅迫的響應》）