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論文開題報(bào)告:左氧氟沙星對蛋白核小球藻的影響

發(fā)表時(shí)間:2013/9/8 17:55:57


大學(xué)本科畢業(yè)論文(設(shè)計(jì))開題報(bào)告
學(xué)院:化工學(xué)院             專業(yè)班級:09環(huán)境科學(xué) 

課題名稱 左氧氟沙星對蛋白核小球藻的影響

1、本課題的的研究目的和意義:
微藻具有很廣泛的實(shí)用價(jià)值,微藻通過光合作用將水、二氧化碳和無機(jī)鹽轉(zhuǎn)化為有機(jī)資源 ,向人類提供蛋白質(zhì)、脂肪和碳水化合物等人體必需的營養(yǎng)要素;微藻中還含有可燃性油類、多種氨基酸、多種維生素、抗生素、高不飽和脂肪酸以及其他多種生物活性物質(zhì)。藻類植物一般處于食物鏈的最底端,作為初級生產(chǎn)者存在,其種類及初級生產(chǎn)量都可對水生生態(tài)系統(tǒng)產(chǎn)生直接的影響,在水生生態(tài)系統(tǒng)中具有重要意義,因而成為監(jiān)測和評價(jià)水環(huán)境質(zhì)量的重要指示生物 。本實(shí)驗(yàn)即以蛋白核小球藻作為指示生物研究左氧氟沙星對其的影響,并探討其機(jī)理。
抗生素目前已成為人類日常生活中最廣泛接觸的化學(xué)品之一,在社會(huì)上學(xué)術(shù)界其泛濫利用和不當(dāng)處置所引起的環(huán)境效應(yīng)已廣受關(guān)注。抗生素被廣泛應(yīng)用于醫(yī)療、水產(chǎn)養(yǎng)殖、家禽飼養(yǎng)、食品加工等各方面?股厝绱藦V范圍強(qiáng)深度的應(yīng)用也帶來了極大的環(huán)境威脅。其在地下水地表水等殘留量持高,甚至有些地區(qū)超過大多水生生物的致
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類代謝產(chǎn)物的合成。國內(nèi)目前對抗生素在調(diào)節(jié)和控制高等
植物生長發(fā)育的作用及作用機(jī)理方面也高度關(guān)注。有學(xué)者研究了抗生素對海洋微藻的葉綠素a含量的影響[12]。實(shí)驗(yàn)表明青霉素一方面可通過促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)核酸和蛋白質(zhì)合成來促進(jìn)葉綠素a的合成,另一方面則通過降低細(xì)胞中葉綠素酶的或醒來延緩葉綠素的降解,從而提高葉綠素a的含量。從而延緩微藻的衰老,增加光合能力和延長光合時(shí)間,提高有機(jī)物質(zhì)產(chǎn)量[13]。潘等人表明,鹽酸左氧氟沙星和阿莫西林抑制集胞藻屬中的光系統(tǒng)II(PSⅡ)活性和電子運(yùn)輸。也有學(xué)者研究了氨芐青霉素對銅綠微囊藻的毒性效應(yīng),發(fā)現(xiàn)其不僅顯著誘導(dǎo)抗氧化活性,不斷加速微藻的細(xì)胞氧化損傷,而且減少psaB、psbD1和rbcL基因的轉(zhuǎn)錄,通過抑制N或P吸收和運(yùn)輸相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄,影響氮(N)、磷(P)的吸收,下調(diào)微囊藻毒素相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄,這引起了微囊藻毒素水平含量的降低[14]。
對抗生素的另一種研究集中在其作為篩選抗性微藻基因工程方面。有學(xué)者采用了八種抗生素(氯霉素、紅霉素、林可霉素、慶大霉素、金霉素、氨芐青霉素、新霉素和鏈霉素)對一株有毒的塔瑪莉亞山大藻進(jìn)行侵染,結(jié)果表明,該藻對抗生素較為敏感,其中的五中:氯霉素、林可霉素、紅霉素、慶大霉素和金霉素對該藻有明顯的生長抑制作用,其對應(yīng)的抗性基因可以作為基因工程陽性選擇標(biāo)記基因[15]。新霉素和鏈霉素雖對其無明顯抑制作用,也可用來菌株無菌化培養(yǎng)而應(yīng)用于甲藻產(chǎn)毒機(jī)制和赤潮爆發(fā)基理的研究。
可見有關(guān)抗生素的研究以及抗生素對藻類影響的研究已經(jīng)有了一定的進(jìn)展,但到目前為止,還沒有人研究過左氧氟沙星對蛋白核小球藻的影響,本實(shí)驗(yàn)就對此進(jìn)行了初步的研究。

3、本課題的主要研究內(nèi)容(提綱)和成果形式:
3.1 研究內(nèi)容
通過用SE培養(yǎng)基培養(yǎng)蛋白核小球藻至對數(shù)生長期,向藻液中添加不同濃度梯度的左氧氟沙星,測定微藻的生物量、某些酶的活性以及可溶性蛋白含量的變化,以及半數(shù)效應(yīng)抑制濃度,為后期探討抗生素對微藻的影響提供支持?jǐn)?shù)據(jù)。

通過分析不同濃度梯度的抗生素作用下微藻光密度值以及葉綠素a含量和微藻細(xì)胞數(shù)量等變化,探討不同濃度的對微藻生長的作用。
B. 不同濃度的抗生素對微藻酶活性的影響




















































3.1.1 不同濃度的抗生素對微藻的半數(shù)效應(yīng)抑制濃度
通過向?qū)?shù)期的藻中加入不同濃度的左氧氟沙星,根據(jù)濃度效應(yīng)關(guān)系曲線以及方程計(jì)算左氧氟沙星對水華微囊藻的EC50值。
3.1.2 不同濃度的抗生素對微藻生物量的影響
通過分析不同濃度梯度的左氧氟沙星作用下微藻光密度值以及葉綠素a含量和微藻細(xì)胞數(shù)量等變化,探討不同濃度的左氧氟沙星對微藻生長的作用。
3.1.3 不同濃度的抗生素對微藻抗氧化系統(tǒng)的影響
通過分析不同濃度梯度左氧氟沙星作用下微藻中超氧化物歧化、過氧化氫酶的活性以及丙二醇含量等的變化,探討不同抗生素對抗氧化系統(tǒng)的影響。
3.1.4 不同濃度的抗生素對微藻可溶性蛋白含量的影響
通過分析不同濃度梯度的左氧氟沙星作用下微藻的可溶性蛋白含量的變化,來探討低濃度的化感物質(zhì)對微藻生理生化的影響。

3.2 成果形式
本課題研究的成果以數(shù)據(jù)、圖表以及機(jī)理分析的形式進(jìn)行表達(dá),數(shù)據(jù)包括原始數(shù)據(jù)和計(jì)算分析獲得的數(shù)據(jù),然后用圖表將關(guān)聯(lián)的數(shù)據(jù)形象地表示出來,以便于對整個(gè)研究過程進(jìn)行機(jī)理分析與討論。





4、擬解決的關(guān)鍵問題:

本項(xiàng)實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵問題是研究不同濃度的左氧氟沙星對蛋白核小球藻的影響,從而進(jìn)一步分析抗生素作用的機(jī)制。















5、研究思路、方法和步驟:
(1)研究思路











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